Histochemical studies on phosphorylase and pas-positive substances in the muscular phase of trichinellosjs

Histochemical procedures (after Takeuchi and Kuriaki, modified by Godlewski) were applied to study the activity of "a", "a" + "b" phosphorylase and phosphorylase-beta-kinase in the muscular tissue of T. spiralis infected mice, examined at various post-infection periods every 2 days between the 5th and 36th day and then with decreasing frequency up to 4 months after infection. Additional studies involved PAS-positive substances and control tests for glycogen. T. spiralis infection was found to affect distinctly the behaviour of phosphorylase. The phosphorylase "a" disappears from the infected muscles and in the neighbouring ones its activity is considerably reduced as compared with the control. After cyst formation, the substance contained between the larval body and the cyst shows again the presence of phosphorylase which tends to increase and its staining properties indicate the synthesis of amylosaccharides. In the larval body (muscular layer) the phosphorylase appears by the 17th day, increases up to the 36th day to decline in later phases (e.g. 4 months after infection). The content of the whole phosphorylase ("a" + "b" + beta-kinase) is increased in noninfected fibres of experimental animals (at 11-25 days of infection) this meaning that there the "a" form passes into the inert "b" one. The decrease in the phosphorylase "a" activity or its lack might indicate augmentation in glycogen reserves of the muscular tissue in infected animals, as postulated by other authors, but the control tests for PAS-positive substances demonstrate that in the infected fibres the increase is true not only for glycogen but also for other polysaccharides. Like in the larval body, the glycogen content is increased exclusively in the muscular layer, whereas in the stichosome cells and in the wall of the alimentary tract glycogen was found to accumulate along with other PAS-positive substances, that are likely to te neutral mucopolysaccharides.

W tkance mięśniowej myszy zarażonych T. spiralis (badanej w różnych okresach po zarażeniu, między 5 a 36 dniem p.z. co drugi dzień, potem rzadziej, aż do 4 mies. p.z.) oraz myszy zdrowych, kontrolnych, śledzono histochemicznie (metody Takeuchi i Kuriaki w modyfikacji Godlewskiego) aktywność fosforylazy "a", "a" + "b" oraz fosforylazo-beta-kinazy. Ponadto badano substancje PAS-dodatnie wraz z odczynami kontrolnymi na glikogen. Okazało się, że zarażenie T. spirafis wpływa wyraźnie na zachowanie się fosforylazy. Fosforylaza "a" ginie zupełnie w włóknach zarażonych i również w włóknach sąsiadujących z nimi aktywność tego enzymu jest słabsza w porównaniu z kontrolą. Po wytworzeniu się torebki w substancji zawartej między larwą a ścianą torebki pojawia się znów fosforylaza, dając z czasem odczyn coraz intensywniejszy, którego zabarwienie świadczy o syntezie amylocukru. W larwach (w warstwie mięśniowej) fosforylaza pojawia się w 17 dniu p.z., jej aktywność wzrasta do 36 dnia p.z., ale w późniejszych okresach (np. po 4 mies. p.z.) widoczny jest spadek aktywności. Zawartość fosforylazy całkowitej ( "a" + "b" oraz fosforylazo-beta-kinazy), zwiększa się w włóknach nie zarażonych pasożytem u zwierząt doświadczalnych (w 11-25 dniu p.z.), co świadczy, że fosforylaza "a" przechodzi tam w postać nieczynną "b". Spadek aktywności fosforylazy "a" lub jej brak mogą świadczyć o zwiększaniu się zapasów glikogenu w tkance mięśniowej zwierząt zarażonych, co stwierdzali już inni autorzy. Przeprowadzone jednak reakcje kontrolne na substancje PAS-dodatnie sugerują, że w zarażonych włóknach zwiększają się nie tylko ilości glikogenu, ale i innych wielocukrów. Podobnie i w larwie glikogen wzrasta tylko w warstwie mięśniowej, natomiast w komórkach stichosomu i ściany przewodu pokarmowego gromadzą się prócz glikogenu inne substancje PAS-dodatnie, może mukopolisacharydy obojętne.